原地的雜交

納米金探針的小尺寸及其隨后接近核抗原的能力，與銀增強(qiáng)獲得的高靈敏度相結(jié)合，使它們成為用于特異DNA序列的超靈敏原位雜交檢測(cè)的優(yōu)異試劑，無(wú)論有無(wú)原位PCR。使用生物素化的酪胺(催化報(bào)道沉積或CARD，也稱(chēng)為酪胺信號(hào)擴(kuò)增或TSA)擴(kuò)增靶信號(hào)獲得了驚人的結(jié)果:用納米金-鏈霉抗生物素蛋白和銀增強(qiáng)檢測(cè)產(chǎn)物，即使在只有一個(gè)或兩個(gè)靶基因拷貝的細(xì)胞中也產(chǎn)生清晰的信號(hào)

用CARD擴(kuò)增納米金-銀染技術(shù)檢測(cè)SiHa細(xì)胞中人乳頭瘤病毒16的單拷貝。這種來(lái)源于宮頸癌的細(xì)胞系僅含有一到幾個(gè)拷貝的人乳頭瘤病毒16，其表現(xiàn)為單個(gè)斑點(diǎn)。細(xì)胞離心制劑，核固紅復(fù)染（光學(xué)顯微照片由薩爾茨堡州蘭肯斯坦市G. Hacker博士提供。奧地利）。

優(yōu)勢(shì)

• 比NBT-BCIP堿性磷酸酶或過(guò)氧化物酶結(jié)合標(biāo)記擴(kuò)增用于單基因拷貝解析更靈敏。
• 大多數(shù)情況下不需要更長(zhǎng)的PCR程序:避免了由于錯(cuò)誤引發(fā)和擴(kuò)增子擴(kuò)散導(dǎo)致的假陽(yáng)性。
• 用標(biāo)準(zhǔn)明視野顯微鏡很容易看到黑色。不需要昂貴的熒光光學(xué)器件，也沒(méi)有自發(fā)熒光或漂白的問(wèn)題。
• 黑色信號(hào)顏色與全強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞和核染色（H & E、核堅(jiān)牢紅、甲基綠）兼容。
• 也可用于電磁研究的高空間分辨率信號(hào)。

電子顯微鏡

納米金為電子顯微鏡樹(shù)立了很好的性能標(biāo)準(zhǔn)。

納米金綴合物很容易擴(kuò)散幾十微米到組織、滲透細(xì)胞和細(xì)胞核中，而大多數(shù)膠體金探針很難做到這一點(diǎn)。染色更符合化學(xué)計(jì)量，背景更低。盡管1.4納米金顆粒在50-120 kX放大倍數(shù)下甚至在80納米的切片中（在其他未染色的樣品中）都是直接可見(jiàn)的，但在用銀顯影劑（LI銀或HQ銀）短暫增強(qiáng)（1-5分鐘）后它們更容易顯現(xiàn)。即使使用醋酸鈾、鋨或檸檬酸鉛染色，也可以在較低的放大倍數(shù)下輕松看到2至100納米的銀顆粒（大小取決于顯影時(shí)間）。

這張掃描透射電子顯微鏡（STEM）圖像清楚地顯示，單馬來(lái)酰亞胺-納米金標(biāo)記（箭頭）具體發(fā)生在IgG分子的鉸鏈硫醇位點(diǎn)。

光學(xué)和共聚焦顯微鏡

用抗微管蛋白初級(jí)抗體標(biāo)記的紡錘體微管，隨后是（左）山羊抗小鼠膠體金或（右）山羊Fab抗小鼠納米金（光學(xué)顯微照片由俄亥俄州立大學(xué)D. Vandré和R. Burry博士提供。原始放大倍數(shù)= 1300倍）。

納米金探針對(duì)透化細(xì)胞和細(xì)胞核具有出色的穿透性，類(lèi)似于免疫熒光探針，遠(yuǎn)優(yōu)于膠體金探針?！凹{米金-Fab"探針比免疫熒光IgG標(biāo)記小。納米金探針絕對(duì)不會(huì)聚集，而且非常穩(wěn)定，因?yàn)榧{米金與結(jié)合生物分子共價(jià)連接。通過(guò)隨后的短暫（5-15分鐘）銀增強(qiáng)（LI銀），它們給出了即使在普通明場(chǎng)光學(xué)顯微鏡（不需要紫外光學(xué)器件）中也可見(jiàn)的信號(hào)，其靈敏度通常優(yōu)于熒光。由于同樣的納米金探針也可以用于電鏡，因此可以在光學(xué)顯微鏡或共聚焦顯微鏡下進(jìn)行初步染色，同時(shí)可以在超微結(jié)構(gòu)水平上檢查平行樣品。這種靈活性是熒光探針?biāo)痪邆涞?。納米金現(xiàn)在可以與鏈霉親和素和抗生物素Fab’結(jié)合用于核酸檢測(cè)。

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印跡和免疫化學(xué)技術(shù)

納米金-抗體結(jié)合物已用于檢測(cè)《0.1皮克（7×10-19摩爾）的抗原。這種靈敏度優(yōu)于大多數(shù)放射性、酶、膠體金或熒光技術(shù)。事實(shí)上，納米金標(biāo)記是已知*靈敏的檢測(cè)方法之一。它與化學(xué)發(fā)光法不相上下，但提供了長(zhǎng)期記錄，沒(méi)有膠片、顯影和暗室程序的麻煩，而且時(shí)間短得多。納米金試劑也可用于Westerns，我們的納米金-鏈霉親和素或納米金-抗生物素結(jié)合物可提供超靈敏的核酸檢測(cè)。

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納米金標(biāo)記條帶的凝膠染色

蛋白質(zhì)或其他分子用納米金標(biāo)記后，可以在聚丙烯酰胺凝膠上運(yùn)行。隨后，可能會(huì)開(kāi)發(fā)出LI Silver或者GoldEnhance™對(duì)含金帶進(jìn)行特殊染色。該過(guò)程快速、靈敏且具有選擇性，只需幾分鐘即可完成密集染色。它也適用于轉(zhuǎn)印污點(diǎn)。這可用于區(qū)分哪些成分用納米金標(biāo)記